看到有關(guān)于兩種方法用于含量測(cè)定的些許疑問(wèn)，今天遠(yuǎn)慕摘錄了很多網(wǎng)友的不同意見。一般建議依照方法的便利性、可重復(fù)性來(lái)選擇適合的方法。再具體點(diǎn)呢?到底如何選擇，哪種方法優(yōu)勢(shì)更甚?都分別有哪些劣勢(shì)?大家都更傾向于哪種?一起來(lái)看看下文各位實(shí)驗(yàn)人的七嘴八舌，你心中是否能夠得到一份答案呢!
網(wǎng)友A：現(xiàn)在看來(lái)，大家普遍認(rèn)為滴定法精密度高，專屬性差;HPLC法精密度和專屬性均可，但需要好的對(duì)照品。各有優(yōu)劣。
網(wǎng)友B：如果從準(zhǔn)確度的角度來(lái)說(shuō)，我選HPLC。就算雜質(zhì)不多，大部分都保留著滴定基團(tuán)，比如高氯酸滴定時(shí)的胺基，但分子量通常比主峰小，含量就會(huì)偏高。不是說(shuō)HPLC就不偏高，大部分含量HPLC方法還是要求雜質(zhì)分離度的，是不是雜質(zhì)看圖就知道了。不過(guò)滴定法還是國(guó)內(nèi)審評(píng)老師的首/選，最近USP有一個(gè)方法現(xiàn)代化的課題，已經(jīng)開始把滴定法慢慢替換成HPLC法。
網(wǎng)友C：很多人認(rèn)為雜質(zhì)不多的話，滴定法好，專屬性高，精度高;雜質(zhì)多的話，HPLC法好，有區(qū)分性。我認(rèn)為HPLC方法更能體現(xiàn)不同樣品間的差異，滴定的精度應(yīng)該沒有其高。而且滴定所受主觀因素影響太大。最好在含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)中能有規(guī)定，何種方法為佳。
網(wǎng)友D：一般而言，儀器測(cè)定比容量法誤差要大一些。在含量方法學(xué)驗(yàn)證中，容量法與UV及HPLC所要求的精密度、回收率都不一樣，明顯儀器測(cè)定允許的偏差要大一些。我不太同意容量法大有被HPLC取代之勢(shì)，一個(gè)好的分析方法，首先必須是簡(jiǎn)便易操作快速的。
網(wǎng)友E：滴定法的最/大優(yōu)勢(shì)在于不需要對(duì)照品，其次則是簡(jiǎn)單便捷。HPLC最大的優(yōu)勢(shì)則在于準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)于滴定法，最大缺點(diǎn)則是需要對(duì)照品，另外就是HPLC本身的測(cè)定誤差，在諸多文獻(xiàn)中都提到當(dāng)誤差在1%~2%之間時(shí)，HPLC根本無(wú)法區(qū)別。
網(wǎng)友F：滴定法的優(yōu)勢(shì)在于精密度和分析速度/成本，HPLC法的優(yōu)勢(shì)在于專屬性。我認(rèn)為當(dāng)API總雜質(zhì)小于0.5%時(shí)，由于HPLC法本身的誤差就有1%左右，選擇滴定法更好;雜質(zhì)大于1%時(shí)，選擇HPLC法更好。所以開發(fā)原料藥含量測(cè)定方法時(shí)，我會(huì)把滴定法和HPLC法都做一遍，在合適的時(shí)間節(jié)點(diǎn)選擇合適的方法。
網(wǎng)友G：滴定分析法，通常適于組分含量在1%以上的常量組分的分析，有時(shí)也可以用于測(cè)定微量組分。該法快速、準(zhǔn)確、儀器設(shè)備簡(jiǎn)單、操作簡(jiǎn)便，可適用于各種化學(xué)反應(yīng)類型的測(cè)定。分析結(jié)果的準(zhǔn)確度較高，一般情況下，測(cè)定的相對(duì)誤差可達(dá)0.1%左右。但是對(duì)滴定的要求比較高需滿足四個(gè)條件：(1)反應(yīng)必須能定量地完成。即所測(cè)物質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)溶液之間的反應(yīng)要嚴(yán)格按一定的化學(xué)方程式進(jìn)行，無(wú)副反應(yīng)發(fā)生。反應(yīng)的*程度通常要求達(dá)到99.9%以上，這是定量計(jì)算的基礎(chǔ)。(2)反應(yīng)要迅速。(3)共存物不干擾主藥反應(yīng)或用適當(dāng)?shù)姆椒ㄏ涓蓴_。(4)有比較簡(jiǎn)便的方法確定化學(xué)計(jì)量點(diǎn)。如指示劑法或其他方法。
網(wǎng)友H：滴定法：精密度好，專屬性差，不需要對(duì)照品。HPLC法：專屬性好，精密度其實(shí)也好(目前的儀器這方面已經(jīng)沒有太大問(wèn)題)，對(duì)照品含量的準(zhǔn)確度至關(guān)重要。
鑒于目前儀器性能的不斷提高，對(duì)照品含量標(biāo)定的準(zhǔn)確度也越來(lái)越準(zhǔn)確，所以建議能用HPLC的就盡量不要選擇滴定，雖然很多人認(rèn)為雜質(zhì)很小的時(shí)候滴定更準(zhǔn)確，誤差較小，其實(shí)雜質(zhì)大小都是一個(gè)相對(duì)的概念;做有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)的時(shí)候雜質(zhì)小于0.1%，未必表示真實(shí)情況雜質(zhì)很小，真實(shí)的雜質(zhì)大小你永遠(yuǎn)無(wú)法知道。
網(wǎng)友I：經(jīng)典滴定法，由于取樣量大，消耗試劑多，相對(duì)誤差一般在0.1%左右，適用于常量檢測(cè)。HPLC，取用樣品量少，甚至采用外標(biāo)法，相對(duì)誤差一般在1～2%。對(duì)于微量檢測(cè)，比如雜質(zhì)檢測(cè)更有優(yōu)勢(shì)。對(duì)于常量分析，與滴定法沒有明顯差異。但是，滴定法快速，簡(jiǎn)潔，不需要特殊設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)品，我傾向于優(yōu)先選滴定法。
網(wǎng)友J：如果說(shuō)非要使用容量法，我覺得還得考察藥物本身的性質(zhì)或者質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收錄的檢查項(xiàng)目：
1、化合物純度高，性質(zhì)穩(wěn)定，潛在的主要降解雜質(zhì)不含有干擾主成分滴定的基團(tuán)，可選擇容量法;
2、化合物純度高，性質(zhì)穩(wěn)定，潛在的主要降解雜質(zhì)含有干擾主成分滴定的基團(tuán)，建議評(píng)估或預(yù)估貨架期內(nèi)雜質(zhì)的增長(zhǎng)情況，如果增長(zhǎng)不大，考慮容量法，否則色譜法;
3、化合物純度高，性質(zhì)不穩(wěn)定，潛在的主要降解雜質(zhì)不含有干擾主成分滴定的基團(tuán)，可以考慮容量法，但是為了減少風(fēng)險(xiǎn)，建議色譜法;
4、化合物純度高，性質(zhì)不穩(wěn)定，潛在的主要降解雜質(zhì)含有干擾主成分滴定的基團(tuán)，為保證專屬性，建議優(yōu)選色譜法;
5、化合物純度低，詳細(xì)考察各種雜質(zhì)對(duì)滴定的影響工作量比較大，建議直接使用色譜法;
6、1-5中推薦使用色譜法也不是絕對(duì)的，如果檢查項(xiàng)中對(duì)主要雜質(zhì)都有比較好的控制，有時(shí)候含量測(cè)定可以犧牲專屬性使用容量法;
7、成本太高的API，建議色譜法。
網(wǎng)友K：其實(shí)就是對(duì)照品的關(guān)系，為什么制劑很少滴定，就因?yàn)闊o(wú)論是仿制還是首研基本都搞不到合法標(biāo)定對(duì)照品。如果有對(duì)照品，肯定選液相法好;只要方法學(xué)穩(wěn)定，耐用性好，肯定選滴定法，當(dāng)然，如果滴定，結(jié)果科學(xué)合理，穩(wěn)定性好，可以自己標(biāo)對(duì)照品，后期可以直接上液相，也是被認(rèn)可的。
至于采取哪種方法，只要經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，合理即可。ICH中不是也認(rèn)可滴定法進(jìn)行含量測(cè)定嗎?另外，在英國(guó)藥典中原料藥的含量大多數(shù)都是采用滴定法的。而有關(guān)物質(zhì)建議采用專屬性好的HPLC法。用HPLC法的時(shí)候，對(duì)照品的含量是個(gè)絕對(duì)因素，特別在無(wú)法得到法定標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，含量的誤差很大程度來(lái)自自制工作對(duì)照品的不準(zhǔn)確，所以還是建議兩種方法對(duì)比，無(wú)法定對(duì)照品的建議用容量法。
