Flag標簽蛋白檢測抗體

　　遠慕生物提供可用于WB，IF，IP應(yīng)用的Flag抗體，特異性檢測Flag標簽融合蛋白，F(xiàn)lag標簽抗體可識別在細胞內(nèi)表達的Flag標記重組蛋白，包括Flag位于氨基末端、中段以及羧基末端的重組蛋白。

　　Flag標簽系統(tǒng)利用一個短的親水性八氨基酸肽（ DYKDDDDK）融合到目標蛋白。Flag標簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端，該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于細菌、酵母和哺乳動物細胞等多種細胞類型，相應(yīng)的Flag標簽抗體也被廣泛應(yīng)用。由于Flag標簽系統(tǒng)的純化條件是非變性的，因此可以純化所有有活性的融合蛋白。Flag標簽可以通過加入腸激酶處理去除，腸激酶專一識別該肽序列C末端的5個氨基酸殘基。Flag抗體可以用于檢測和Flag標簽融合表達蛋白的表達、細胞內(nèi)定位，以及純化、定性或定量檢測Flag融合表達蛋白等。

　　由于Flag標簽蛋白檢測抗體親水特性，F(xiàn)lag標簽往往位于融合蛋白的表面上，因此比較容易被抗體接近并識別。不同的Flag標簽抗體與Flag標簽 有不同的識別和結(jié)合特性。

　　Fig. 1. Flag標簽蛋白IP實驗，IP (1:200) - WB (1:5,000)：未轉(zhuǎn)染的293細胞裂解液(lane A), 轉(zhuǎn)染了Flag標簽蛋白的293細胞轉(zhuǎn)染裂解液 (lane B), 使用小鼠IgG作為陰性對照免疫沉淀293細胞裂解液(lane C),使用Flag單克隆抗體（1B10）IP轉(zhuǎn)染后的293細胞裂解液(lane D), 293細胞裂解液 中僅加入Protein G Beads (lane E).

　　Fig. 2. 使用Flag標簽單克 隆抗體，通過免疫熒光實驗（1:2000），分析轉(zhuǎn)染的Flag 重組蛋白在293細胞中的定 位，二抗為IFKine? Red 驢抗 小鼠，藍色為DAPI染色的細 胞核。